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      審計追蹤液相色譜的液質聯用技術介紹
      點擊次數:121 發布時間:2019-01-10
        審計追蹤液相色譜的液質聯用技術介紹
        液質聯用,即審計追蹤液相色譜 -質譜聯用技術,是目前很好的檢測技術,以其快速的分離能力、超高的靈敏度著稱.本文將介紹液質聯用法的原理,優點,分離方法以及應用,對于想要發高分文章,希望自己的數據被認可的客戶,可以了解一下。
        液質聯用的原理:
        液質聯用是以審計追蹤液相色譜為分離系統,質譜為檢測系統。樣品經過審計追蹤液相色譜分離后,流動相分流進入質譜儀,在離子源被電離,產生帶有一定電荷、質量數不同的離子。質譜儀依據不同離子在電磁場中的運動行為不同來檢測各個離子,根據每一個離子的質荷比(質量與電荷數比值)不同,顯示在色譜圖上,后通過對色譜圖的分析,得到樣品的檢測數據。
        液質聯用法對于樣品的要求:
        同任何其他分析方法一樣,樣品前處理在LC-MS分析中是重中之重的。對所用樣品,無論是什么類別,都有如下要求:
        樣品清潔,盡量不含雜質,由于蛋白質和肽類在ESI上有很強的響應,這兩樣化合物尤其要注意;
        樣品不宜含有高濃度的難揮發酸(磷酸,硫酸等)及其鹽,這些會引起液質聯用儀很強的噪聲;
        為了防止堵塞柱子、噴口及毛細管入口,樣品的粘度不要太大。
        液質聯用法用于樣品分離的常用方法:
        1.固相萃?。⊿PE)
        這是應用廣泛的處理樣品的方法,固定相是吸附劑,流動相是萃取過程中的水樣。當固定相與流動相接觸時,其中的某些痕量物質就保留在固定相中。這時用少量的選擇性溶劑洗脫,即可達到富集和純化目標物的目的。
        分離方法的比較
        方法優點缺點
        液液萃取法儀器設備簡單,應用廣泛工作量大,溶劑消耗大,污染環境
        蛋白沉淀操作簡單,儀器設備簡單檢測靈敏度低,非特異性沉淀
        固相萃取回收率高,重現性好。需要建立方法,成本較高
        2.阻定性進入介質:
        阻定性進入介質(restricted access media,RAM)有兩層不同的表面,即外層表面與內層表面,外層表面通過體積排除作用僅允許小分子進入內層表面。內層表面通過傳統的分配作用“捕獲”被分析物。RAM介質常用于在大分子共存時小分子樣品的分離和富集.可有效地除去血液和尿液中的基質。
        3.灌注固相萃?。?br />  灌注填料是近些年才出現的一種填料,顆粒上同時有貫通型的孔以及擴散型的穴。這種填料制成的固相萃取用品或液相柱,可以以每min幾十ml的速度上樣,用于諸如培養基中蛋白質和肽類的分離、富集和脫鹽,具有不可比擬的優勢。
        4.超濾:
        超濾(ultrafiltration)是一種加壓膜分離技術,小分子溶質和溶劑在一定壓力下,穿過一定孔徑的特制的薄膜,過濾了大分子物質,從而達到純化大分子物質的目的。具有操作簡便,成本低廉,條件溫和等眾多優勢,但不能用于蛋白溶液。
        5.免疫親和萃?。?br />  免疫親和萃取是基于固相化的配基(抗體)和樣品之間的相互作用的樣品前處理方法,具有分離效率高、專屬性高等優點。其原理是分析物(抗原)結合特異性抗體,可以通過不同于樣品溶液PH或離子強度的緩沖液洗脫而達到分離和純化的目的。 上一篇 淺析EPC氣相色譜法在煤化工領域的應用 下一篇 苯系物檢測氣相色譜的基本原理和優缺點

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